б) в яичниках обнаруживают множественные кровоизлияния в фолликулы в виде кровяных точек;
в) в яичниках находят атретические желтые тела (лютеинизация фолликулов).
Диагноз беременности ставится при наличии 2–3 видов реакции. Достоверность метода достигает 98 %. Недостатки реакции – значительная продолжительность;
2) реакция Фридмана.
Для диагностики беременности используется половозрелая крольчиха в возрасте 3–5 месяцев массой от 900 до 1500 г. Мочу беременных вводят в ушную вену крольчихе 6 раз в течение 2 суток по 4,0 мл. Через 48–72 ч после последней инъекции под эфирным наркозом вскрывают брюшную полость и осматривают половые органы. При положительной реакции в яичниках и матке наблюдаются изменения, аналогичные выявляемым у мышей при постановке реакции Ашгейма – Цондека. Достоверность реакции – 98–99 %.
3) Сперматозоидная (сперматоурическая) реакция Галлы-Майнини проводится на озерных лягушках-самцах. Метод основан на том, что у лягушек вне естественного периода размножения в содержимом клоаки никогда не бывает сперматозоидов. Перед проведением реакции необходимо исследовать содержимое клоаки лягушки для исключения спонтанной спермареи. Затем 3–5 мл мочи беременной женщины вводят в лимфатический мешок, расположенный под кожей спины лягушки. Через 1–2 ч исследуют жидкость из клоаки лягушки под микроскопом. При положительной реакции в клоачной жидкости обнаруживается большое количество подвижных сперматозоидов. Точность реакции составляет 85-100 %. Преимущество метода заключается в быстроте постановки реакции.
Иммунологические методы исследования основаны на обнаружении в моче обследуемой женщины хорионического гонадотропина. Наиболее часто применяется метод, основанный на торможении реакции гемагглютинации обработанных хорионическим гонадотропином в присутствии хорионического гонадотропина, содержащегося в моче беременных.
Основные этапы метода.
1. Иммунизация хорионическим гонадотропином кроликов для получения антисыворотки. Антигенную эмульсию готовят из растворенного хориогонина в дозе 300 ЕД в 0,4 мл изотопического раствора натрия хлорида и 0,6 мл вазелинового масла. Полученную эмульсию вводят крольчихам массой до 2,5 кг под кожу трижды, с интервалами между инъекциями в 2 недели. Через 2 недели после последней подкожной инъекции крольчихе вводят в ушную вену 3000 ЕД хориогонина. Через 10–12 дней титр антител в крови животного достаточен для проведения реакции.
2. Обработка антисыворотки.
Взятую у иммунизированной крольчихи из ушной вены кровь оставляют на сутки в холодильнике при температуре 4ºC. Через сутки верхний слой (антисыворотку) разливают в пробирки по 1,5 мл и помещают на 30 мин на водяную баню для инактивации при температуре – 56ºC. После обработки антисыворотки азидом натрия ее замораживают. В таком виде антисыворотка может храниться длительное время. Перед применением антисыворотку подвергают «истощению», для чего 1,5 мл ее смешивают с 0,75 мл