Итальянская живопись составляет самый большой раздел собрания. В экспозиции представлены жемчужины итальянской школы живописи: шесть полотен Боттичелли, в том числе одна из самых знаменитых его картин «Венера и Марс»; картины Фра Беато Анжелико; Антонелло да Мессина; Мазаччо; Паоло Учелло; Фра Филиппо Липпи; Пьеро Делла Франческа; Андреа Мантеньи; Пьетро Перуджино. Здесь можно увидеть две картины Микеланджело: «Погребение Христа» (1497–1498) и «Мадонну с Младенцем и маленьким Иоанном Крестителем» («Манчестерская мадонна», ок. 1495 г.). Кроме того, в экспозиции представлены также картины «Сон рыцаря» (1504–1505), «Мадонна с Младенцем и маленьким Иоанном Крестителем» (1509–1510), «Проповедь св. Иоанна Крестителя» (ок. 1505 г.). Маленькая картина «Сон рыцаря» дает представление о раннем творчестве Рафаэля, когда ему было немногим более двадцати лет. Юному рыцарю на этой картине, как и самому молодому художнику, грезятся сладкие сны. Но даже во сне приходится делать непростой выбор – между книгой и цветком, между тяжким и легким жизненными путями. К этому же периоду относится и картина «Проповедь Святого Иоанна Крестителя». Исследователи предполагают, что это единственное дошедшее до нас изображение из пределлы (нижней створки алтаря) Мадонны Ансидеи в Перудже. Декоративная манера письма и некоторая схематичность в построении композиции напоминают о том, что молодой Рафаэль в эту пору находился под влиянием своего учителя Пьетро Перуджино. «Мадонна с Младенцем и маленьким Иоанном Крестителем» была создана в Риме в период творческой зрелости художника – в 1509–1510 гг. Задумчив и прекрасен лик Богоматери, весь образ которой – само совершенство.
Очень полно представлена в собрании Лондонской Национальной галереи итальянская живопись