Однако, супружество сразу не заладилось. Вскоре после обручения девица неожиданно занемогла и "спала с тела". Венчание состоялось 28 октября 1571 в Троицком соборе Александровской слободы. Почти сразу молодую, ядреную девку, сразила неведомая хворь. Она стала "сохнуть" на глазах, а 13 ноября 1571 отдала Богу душу.
В царском указе было объявлено, что Марфа Собакина фактически так и не стала женой Ивана, поэтому церковный собор признал этот брак недействительным. О причинах же смерти ходили самые невероятные слухи: якобы, мать Марфы приготовила для нее некое "чадородное" средство, а Михаил Темрюкович, брат Марии Черкасской, по злобе подменил его на отраву…* (* В 1930-ых гробница Марфы Собакиной была вскрыта учеными. Они обнаружили удивительный феномен: тело царской невесты полностью сохранилось и даже не было тронуто тлением, хотя пробыло под землей без малого 400 лет.) Грозный не пожелал вникать в подробности, а сразу принял свои меры: черкесский князь Михаил, вместе с ближайшими родственниками, был посажен на кол.
Этот исторический эпизод лег в основу пьесы Л.А.Мея «Царская невеста» (1849). В 1899 Н.А.Римский-Корсаков создал одноименную оперу, которая была экранизирована в 1965. Образ Марфы Собакиной присутствует в пьесе М.А.Булгакова «Иван Васильевич» и в поставленном по ней фильме Л.Гайдая “Иван Васильевич меняет профессию” (1973).
Из числа не успевших еще разъехаться претенденток Иван отобрал новую невесту – восемнадцатилетнюю Анну Ивановну (по другим данным, Анну Алексеевну) Колтовскую, дочь мелкопоместного дворянина. На совершение этого брака потребовалось особое разрешение церкви. Царь добился своего, оправдываясь государственной необходимостью и тяготами одинокого отцовства. 29 апреля 1572 церковный собор разрешил ему жениться в четвертый раз. Семейная жизнь продолжалась неожиданно долго – целых три года. А.Колтовская проявила себя очень независимой особой и, даже, пыталась бороться с произволом опричнины. Этот период вошел в русскую историю как "бабье царство".
Главный недостаток Анны Колтовской заключался в том, что она не смогла родить наследников. В 1575 Иван заточил бесплодную жену в Тихвинский монастырь и насильно